一、名词解释（40分，每个4分）

Gene expression、RNA splicing、probe、Genetic engineering、Repressor protein、microsatellite DNA、GFP、RACE、nested PCR、multi gene family

二、问答题（60分，每个10分）

1.        请写出6种以上RNA及其功能。

2.        5'端帽子和polyA尾巴各有什么功能。

3.        简述原核生物转录终止的两种主要机制。

4.        简述原核生物与真核生物启动子的主要差别。

5.        简述一代测序技术和二代测序技术原理和特点。

6.        比较基因组、转录组、蛋白质组和代谢组的异同。

三、分析题（50分）

现要求以某一植物或动物组织cDNA为模板扩增A基因，并构建该基因的重组表达质粒pET-28a-A，并在大肠杆菌BL21中进行表达。

1、写出从组织中抽取RNA的关键步骤，并解释如何判断RNA质量。（20分）

2、根据A基因序列设计原核表达引物。（10分）

A基因序列如下：

ATGTCCGAAGTAATCGAAGAACATCTTCTCAGCGATAATTCTGATGATTCCAGCTCGGAATTGACTTCTAC……… GGACGAACCACGAAGAGACGATATTAA

引物设计必须满足：1）要求在引物两端分别加上BamHI（GGATCC）和EcoRI（GAATTC）。

2）要求表达的重组蛋白C端带His标签。

3、写出原核表达实验步骤。（20分）